Unidade Multiusuária
MICROSCOPIA CONFOCAL
Responsável Técnica
Grasiella Matioszek
Objetivo
Realiza aquisição de imagens de alta resolução e análises de fluorescência por microscopia confocal (FRAP, FRET, Time-Lapse), tanto para materiais biológicos fixados, quanto para materiais biológicos e organismos vivos.
Apresentação
A microscopia confocal é ferramenta fundamental para a maioria dos estudos em biologia celular e morfologia, pois possibilita a localização de células, organelas ou outros componentes subcelulares, proteínas citoplasmáticas em secções do tecido, fornecidas em imagem digital de alta resolução. No microscópio Confocal todas as estruturas fora de foco são eliminadas na formação da imagem, deixando a imagem com melhor definição e profundidade do campo em relação à microscopia de fluorescência convencional. Outra vantagem é que ao fornecer imagens em secções ópticas para amostras com maior espessura, possibilita a análise de uma imagem em 3D. A microscopia confocal é utilizada, então, para: 1) Observação de células e tecidos oriundos de material normal e patológico, vegetais e invertebrados marcados com fluorocromos; 2) Construção de imagens em 3D; 3) Análise de colocalização de moléculas; 4) Observação do estado fisiológico das células e tecidos através de aquisição de imagens em tempo real (4D).
A Unidade Multiusuária de Microscopia Confocal do ICB – UFRJ (UMMC) é composta atualmente por um Microscópio de Fluorescência convencional – Olympus BX53, dois microscópios Confocais: Microscópio Confocal Leica TCS SP5 AOBS e Microscópio Confocal Leica TCS SPE, e o sistema Celldiscoverer 7 Zeiss – sistema totalmente automatizado, especializado na aquisição de imagens em tempo real equipado com LSM 900 Airyscan 2 (campo claro, fluorescência e confocal com alta resolução).
Equipamentos:
1) Microscópio Confocal Leica TCS-SP5 AOBS:
– Linhas de laser disponíveis: Diodo 405 nm, Argônio 456 nm, Argônio 476 nm, Argônio 488 nm, Argônio 496 nm,Argônio 514 nm, HeNe 543 nm, HeNe 594 nm, HeNe 633 nm
– Platina motorizada XY – Tile Scan
– Galvanômetro para deslocamento em Z
– Câmara de incubação com controle de temperatura
– Controle de CO2
– DIC e polarização
– Microscópio equipado com filtros de fluorescência de espectro largo Filtro A – UV; Filtro I3 – azul e Filtro N2.1 – verde)
– Tandem Scanning System SP5 (8000Hz)
– 3 detectores espectrais livremente ajustáveis (AOBS) e 1 detector de luz transmitida
– Software LAS-AF com os módulos para análise de:
– Colocalização
– Live Data Mode
– FRAP
– FRET
2) Microscopio Confocal Leica TCS-SPE
– Lasers: Diodo 405, diodo 488, diodo 532 e diodo 647.
– Galvanômetro para deslocamento em Z
Para agendar o uso dos equipamentos:
Para solicitar agendamento, entrar em contato através do email grasiella@icb.ufrj.br ou pelo telefone (21)98731-5106. É possível consultar a disponibilidade da sala na agenda abaixo.